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銀屑病患者血小板表面α-顆粒膜蛋白的放射免疫測(cè)定

生活百科銀屑病

血小板從靜止?fàn)顟B(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂泄δ艿幕罨“鍟r(shí) ， 內(nèi)源性血小板蛋白被表達(dá)［1 ， 2］ 。一般認(rèn)為 ， 血小板聚集導(dǎo)致的血液高凝和粘度增高在銀屑病的發(fā)病中起一定作用［3］ 。為此 ， 我們用活化血小板特異單克隆抗體(單抗)來(lái)定量測(cè)定銀屑病患者體內(nèi)血小板活化程度 。

銀屑病患者血小板表面α-顆粒膜蛋白的放射免疫測(cè)定

文章插圖

一、病例和方法
【銀屑病患者血小板表面α-顆粒膜蛋白的放射免疫測(cè)定】 (一)研究對(duì)象：隨機(jī)選擇1992年8月至1996年10月來(lái)我院的尋常型銀屑病患者31例 ， 其中男18例 ， 女13例；平均年齡37.2歲；病程1周至30年 ， 平均8.3年 。所有患者檢測(cè)前1個(gè)月未經(jīng)皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑等治療 。對(duì)照組：健康正常人共50例 ， 其中男25例 ， 女25例；平均年齡35歲 。
(二)測(cè)定方法［4］：sz-51為一株抗人活化血小板表面顆粒膜蛋白(gmp-140)單抗 ， 由我院血栓與止血研究室提供 。將加抗凝劑靜脈血0.5ml與等量的5%戊二醛固定劑混合 ， 室溫下放置30分鐘 ， 即為固定的全血 。取含2.5×106血小板數(shù)的固定全血 ， 以苔氏血小板洗滌液(kcl 2.6mmol/l、mgcl２*6h２o 9mmol/l、nacl 137mmol/l、nahco３ 12mmol/l、葡萄糖 5.5mmol/l、edta 0.2mmol/l、白明膠0.25%)洗滌1次 ， 加入125i-sz-51抗體(0.1μg/管) ， 終體積為50μl ， 0.5% bsa-苔氏血小板洗滌液洗滌、離心 。在γ-計(jì)數(shù)儀上測(cè)定待測(cè)物的c/min(cpm) ， 每份標(biāo)本均測(cè)定復(fù)管 ， 非特異吸附以100倍未標(biāo)記的單抗同時(shí)加入反應(yīng)管 ， 將特異結(jié)合的c/min換算成每個(gè)血小板上gmp-140表達(dá)的分子數(shù) 。
(三)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：用t檢驗(yàn)對(duì)兩組進(jìn)行比較 。
二、結(jié)果
31例銀屑病患者的血小板表面gmp-140的分子數(shù)為1146±322(分子數(shù)/血小板) ， 較50例健康正常人(780±490)明顯升高 ， 經(jīng)t檢驗(yàn) ， t=3.6895 ， p＜0.01 。
三、討論
本研究利用單抗sz-51來(lái)測(cè)定血小板表面活化標(biāo)記蛋白gmp-140的分子數(shù) 。鑒于單抗sz-51不與靜止血小板、紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血漿蛋白等反應(yīng) ， 它活化血小板是特異的 ， 因此 ， 可被用作直接測(cè)定血小板的活化程度 。
一般認(rèn)為 ， 血小板從靜止?fàn)顟B(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂泄δ艿幕罨“鍟r(shí) ， 其形態(tài)、生化代謝要發(fā)生改變 ， 隨顆粒內(nèi)容物的釋放 ， 顆粒膜蛋白與開(kāi)放管道系統(tǒng)膜融合而整合至活化血小板質(zhì)膜內(nèi) ， 因此 ， 正常人血漿內(nèi)gmp-140含量極少 。α-顆粒是血小板中數(shù)量最多的細(xì)胞器 ， 呈球形 ， 直徑300～500nm ， 是血小板中可分泌蛋白質(zhì)的主要貯存部位 。α-顆粒中含有許多炎癥因子 ， 包括血管通透性因子、化學(xué)趨化因子、殺菌因子等 ， 表明血小板不僅在止血、血栓形成和動(dòng)脈粥樣硬化中起作用 ， 亦可能與炎癥、免疫反應(yīng)相關(guān) 。既往研究表明［3］ ， 銀屑病患者血液粘度增高 ， 血小板功能亢進(jìn)及其聚集性增高 ， 與本研究結(jié)果一致 。本研究表明銀屑病患者血小板α-顆粒膜蛋白分子數(shù)顯著升高 ， 提示體內(nèi)有較高程度的血小板活化 ， 亦與上述研究結(jié)果一致 。

    經(jīng)驗(yàn)總結(jié)擴(kuò)展閱讀