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革蘭氏染色四種染液,常用微生物染色的方法

1、常用微生物染色的方法革蘭染色
抗酸染色:分支桿菌屬,諾卡放線菌屬 。石炭酸復(fù)紅染色,金永染色 。
芽孢染色:用于區(qū)分細(xì)菌的芽孢和營養(yǎng)細(xì)胞 。結(jié)果芽孢染成綠色,營養(yǎng)細(xì)胞為紅色 。
晶體染色:觀察蘇云金桿菌不同變種的晶體形狀大小 。結(jié)果晶體染成紫色,芽孢為透明橢圓形,僅見具有輪廓的折光體 。
鞭毛染色:有賴夫生染色法、銀鹽染色法,西薩-基爾染色法等 。一般以西薩-基爾(Cesares-Gill)染法效果最佳 。
異染顆粒染色:用于白喉棒狀桿菌染色,直接涂片或改良阿伯特法染色 。
墨汁莢膜染色:觀察菌體有無莢膜,如新型隱球菌 。碳素墨汁 。
鍍銀染色:螺旋體
吉姆薩染色:螺旋體
熒光染色
魏申染色(wayson)染色:鼠疫耶爾森桿菌 。
鉻酸P、A、S真菌類染色 。結(jié)果:曲霉菌、念球菌屬、細(xì)胞漿菌屬、隱球菌屬為紅紫色 。曲霉菌絲周邊紫紅色,彈力纖維紫色,背景綠色 。
Mann氏甲基藍(lán)伊紅染色法:病毒包涵體染色 。Negri氏小體紅色 。
Nacchiavello氏染色:病毒包涵體染色 。結(jié)果:包涵體、立克次氏體均染紅色,其余組織呈藍(lán)色 。
Crocott-Gomori氏六胺銀法:新型隱球菌
碘染色法吉姆薩染色:衣原體
乳酸酚棉藍(lán)染色,糖原染色:真菌,前者適用于所有真菌,呈藍(lán)色 。
吉姆薩染色,瑞氏染色:鞭毛蟲,滴蟲,錐蟲,瘧原蟲,弓形蟲,隱孢子蟲等原蟲 。
三色染色,碘染色:阿米巴等原蟲 。
熒光素吖啶橙染色:瘧原蟲 。
金胺-酚染色:隱孢子蟲 。
甲苯胺藍(lán),四胺銀染色:耶氏肺孢子蟲 。
檢驗常用染色法包括 1)革蘭氏染色法 2)抗酸染色法 3)美蘭染色法 4)異染顆粒染色法 5)細(xì)菌鞭毛染色法 6)莢膜染色法芽孢染色法 7)布氏桿菌科茲洛夫斯基染色法 8)結(jié)核桿菌熒光染色法等主要染色法 革蘭氏染色法染液配制 1 。結(jié)晶紫染液:稱取結(jié)晶紫(龍膽紫)14g,溶于95%酒精100ml中,配成飽和液,再取飽和液20ml與1%草酸銨溶液(1g草酸銨溶于100ml蒸餾水溶解即成)80ml混勻即成2 。盧戈氏碘液:碘化鉀2g于10ml蒸餾水中,再加碘1g,待碘全部溶解后(時間較長)加蒸餾水200ml即成3 。95%酒精4 。(1)石碳酸復(fù)紅液:稱取堿性復(fù)紅(堿性品紅)4g溶于95%酒精100ml中成飽和液 , 再取飽和液10ml與5%石碳酸溶液(5ml石碳酸溶于100ml蒸餾水)90ml混勻即成,(2)稀釋石碳酸復(fù)紅液:取石碳酸復(fù)紅液10ml加入蒸餾水90ml即成染色方法:1 。涂片 將菌液直接涂在載玻片上,經(jīng)培養(yǎng)的菌落要加生理鹽水混勻涂片,等待干燥(固定)2 。將結(jié)晶紫染液滴加在已固定的涂片上,染色1分鐘后用水沖去剩余燃料3 。滴加盧戈氏碘液1分鐘后水洗,在滴加95%酒精脫色 , 搖動玻片至紫色不在脫色為止(約需1分鐘),水洗4 。用稀釋石碳酸復(fù)紅液復(fù)染30秒至1分鐘5 。水洗待干,鏡檢6 。革蘭氏陽性菌染成紫色,革蘭氏陰性菌染成紅色

革蘭氏染色四種染液,常用微生物染色的方法

文章插圖
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2、革蘭氏染色法的有關(guān)問題1.分別找兩種已知的G+和G-菌,用完全一致的手段對其操作染色,若鏡檢結(jié)果與已知事實相符,則此時可認(rèn)為染色操作是正確的,結(jié)果是可靠的 。
2.分離成單個菌體、在培養(yǎng)基中培養(yǎng)成菌斑,涂板、染色、顯微鏡就可以找到染色體非常清晰的染色菌體!3. 一般設(shè)置一個對照
即取一株生長健壯 , 且已知其革蘭氏染色反應(yīng)的菌株,與待檢測的菌株一同染色 , 染色時間、染液量一致 。染色后一同做鏡鑒 。
一般G+選枯草芽孢桿菌,G-取大腸桿菌 4.

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