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系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細胞胞漿抗體的檢測

生活百科紅斑

抗中性粒細胞胞漿抗體(anca)是針對中性粒細胞和單核細胞胞漿蛋白的自身抗體 。該抗體被普遍認為是系統(tǒng)性血管炎的標(biāo)記抗體 。間接免疫熒光法(iif)檢測anca有3種熒光圖譜 ， 胞漿型(c-anca)、核周型(p-anca)和非典型型(a-anca) 。為探討anca與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)的關(guān)系及其臨床意義 ， 我們采用iif法對63例sle患者血清進行檢測 。
【系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細胞胞漿抗體的檢測】

系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細胞胞漿抗體的檢測

文章插圖

一、材料與方法
1.對象:sle患者63例 ， 為本科住院患者 ， 年齡12～62歲 ， 平均30歲 ， 病程1個月至25年 ， 平均3.8年 。所有患者均符合美國風(fēng)濕病協(xié)會1982年的診斷標(biāo)準(zhǔn) 。另選擇42例正常健康人作為對照 。
2.anca檢測:從正常獻血員抗凝血中分離出中性粒細胞 ， 用細胞離心涂片機制備抗原片 ， 1000r/min離心4min ， 無水乙醇4℃固定5min ， 吹干 。標(biāo)本血清用0.01mol/lpbs1∶10稀釋加在抗原片上 ， 37℃孵育30min ， pbs洗3次 ， 每次5min ， 吹干 。加1滴羊抗人igg熒光抗體(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供 ， 用時1∶40稀釋)于抗原片上 ， 同上37℃孵育30min ， pbs洗3次 ， 吹干 。加緩沖甘油封片 ， 熒光顯微鏡下觀察結(jié)果 。中性粒細胞胞漿出現(xiàn)特異性熒光者為c-anca ， 細胞核周圍出現(xiàn)特異性熒光者為p-anca ， 不典型熒光著色者為a-anca ， 胞漿及核周圍均無特異熒光染色者為陰性 。每例標(biāo)本均進行2次以上檢測證實 。
3.抗核抗體(ana)檢測:以小鼠肝切片為底物 ， 采用iif 。抗dsdna抗體采用放射免疫分析法檢測 。抗ena抗體采用對流免疫電泳法檢測 。
4.統(tǒng)計學(xué)處理:采用χ2檢驗 。
二、結(jié)果
1.42份正常健康人血清均為陰性 ， 63例sle患者血清26例anca陽性(41.3％) ， 其中p-anca15例 ， a-anca11例 。
2.在anca陽性組 ， 漿膜炎及多系統(tǒng)受累的sle患者明顯高于陰性組 ， 而肝損害、肺部病變、皮損及心電圖異常在兩組之間沒有差異(見表1) 。抗dsdna抗體陽性及中度以上貧血(血紅蛋白＜90g/l)的sle患者在anca陽性組明顯高于陰性組(見表2) 。
表1　anca與sle臨床表現(xiàn)的關(guān)系[例數(shù)(％)]
臨床表現(xiàn)anca陽性(26例)anca陰性(37例)χ2值p值蝶形紅斑13(50.0)16(43.2)0.281＞0.05盤狀紅斑及紫癜19(73.1)25(67.6)0.220＞0.05口腔潰瘍11(42.3)17(45.9)0.082＞0.05腹水4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05漿膜炎13(50.0)6(16.2)8.274＜0.01心電圖異常6(23.1)14(37.8)1.534＞0.05肺部病變4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05肝臟損害6(23.1)3(8.1)2.794＞0.05多系統(tǒng)受累14(53.8)9(24.3)5.741＜0.05 表2　anca與sle其它實驗室檢查的關(guān)系[例數(shù)(％)]
實驗室檢查anca陽性(26例)anca陰性(37例)χ2值p值24h蛋白尿＞0.15g/l22(84.6)30(81.1)0.132＞0.05血小板＜100×109/l5(19.2)8(21.6)0.053＞0.05白細胞＜4.0×109/l10(38.5)15(40.5)0.028＞0.05血紅蛋白＜110g/l21(80.8)22(59.5)3.200＞0.05＜90g/l12(46.2)8(21.6)4.241＜0.05血沉＞20mm/lh22(84.6)31(83.8)0.008＞0.05ana陽性26(100)33(89.2)3.000＞0.05坑ds-dna抗體陽性10/108/17(47.1)7.941＜0.01抗sm/抗陽性5(19.2)11(29.7)0.888＞0.05抗ssa/抗ssb陽性10(38.5)20(54.1)1.488＞0.05 三、討論
debandt等[1]在11例sle患者血清中檢測出1例p-anca ， 4例a-anca 。lawton和lee[2]在46例sle患者中檢測出14例p-anca 。而我們在63例sle患者中發(fā)現(xiàn)15例p-anca ， 11例a-anca 。在sle患者血清中未見有c-anca的報道 。這些不同的熒光圖型是由多種抗原成分所致 。c-anca的主要抗原成分為蛋白酶3(pr3) ， p-anca的主要抗原成分為髓過氧化物酶(mpo) ， a-anca的抗原成分目前尚不清楚 。afelera等[3]的研究發(fā)現(xiàn) ， 抗中性粒細胞胞漿抗原和核抗原的免疫應(yīng)答不同 ， 本文結(jié)果也未發(fā)現(xiàn)ana與anca有相關(guān)性 。

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