應用二步聚合酶鏈反應(pcr)檢測皮膚t細胞淋巴瘤(ctcl)的t細胞受體(tcr)基因重排，提高其準確性和特異性，并應用已知重排的cdna序列，推測該病患者的特異肽鏈順序，為免疫治療提供新線索和途徑 。
【二步聚合酶鏈反應檢測皮膚T細胞淋巴瘤的T細胞受體基因重排】
文章插圖
方法 先用tcr基因重排區(qū)域以外的部分為引物，做10～30個循環(huán)擴增 。取得一定數(shù)量的cdna，作為模板，再經(jīng)30～40個循環(huán)擴增，獲得較純的cdna 。然后將此產(chǎn)物放入質(zhì)粒，進一步分析dna序列 。按照分析結(jié)果，制備出特異的分子探針，對二步pcr擴增產(chǎn)物進行分子雜交，推測出患者的特異性肽鏈順序 。結(jié)果 以vβ8為特殊引物所顯示的反應帶明顯，用vβ8順序制成的分子探針雜交，示明顯的特異性結(jié)合 。特異性分子探針只與ctcl患者的cdna雜交，與對照組標本不發(fā)生交叉反應 。結(jié)論 二步pcr可準確地檢測ctcl的tcr基因重排，其特異性強，并可在此基礎上應用已知重排的cdna序列推測該病患者的特異性肽鏈，為免疫治療提供新線索和途徑 。
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