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銀屑病角朊細(xì)胞FasIceBax及bcl2基因的表達(dá)

生活百科銀屑病

一、資料和方法
病例：15例銀屑病及5例正常成人皮膚取自本科及美容科 。組織塊均常規(guī)石蠟包埋、切片 ， he染色并經(jīng)病理證實(shí) 。試劑及染色方法：促凋亡基因fas、ice、bax及抗凋亡基因bcl-2之多克隆或單克隆抗體均購(gòu)自santa cruz公司 。abc染色參照vector lab說明并稍加改進(jìn)進(jìn)行 ， 一抗1∶100稀釋 ， abc顯色 ， 設(shè)正常人皮膚及pbs替代一抗對(duì)照染色 ?？贵w標(biāo)記率以每份切片5個(gè)高倍視野下同類細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞的百分率計(jì)算 。

銀屑病角朊細(xì)胞FasIceBax及bcl2基因的表達(dá)

文章插圖
定量圖像分析：采用德國(guó)sis圖像分析系統(tǒng) ， 選擇免疫組化染色切片 ， 在100倍顯微視野下盡可能選擇具有代表性的完整表皮全層照象 。然后在一定的閾值下分割抗體陽(yáng)性細(xì)胞 ， 進(jìn)行如下測(cè)量：①陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)密度(個(gè)/μm２) ， ②面積密度(μm２／μm２)(陽(yáng)性細(xì)胞面積之和/被觀測(cè)之總面積) 。
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：計(jì)量資料以±s表示 ， 并進(jìn)行t檢驗(yàn) 。
三、結(jié)果
凋亡基因抗體染色陽(yáng)性細(xì)胞的染色及分布特征：正常表皮角朊細(xì)胞：fas、ice基本上不著色 ， bax輕度著色 ， bcl-2也呈輕度著色；陽(yáng)性細(xì)胞散在于基底細(xì)胞或棘細(xì)胞層 。銀屑病角朊細(xì)胞：fas、ice除在少數(shù)病例(3/15)輕度著色外 ， 其余病例基本不表達(dá)；bax呈中度著色 ， bcl-2重度著色；陽(yáng)性物質(zhì)分布于核膜、胞漿或細(xì)胞膜 ， 陽(yáng)性細(xì)胞分布于表皮全層 ， 以棘細(xì)胞層為著 。
2.bax及bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞的標(biāo)記率：由表1可見銀屑病組bax、bcl-2陽(yáng)性表達(dá)均顯著高于正常人對(duì)照組(p＜0.01) 。
3.bax及bcl-2標(biāo)記的定量圖像分析：表2中各項(xiàng)測(cè)量均值顯示銀屑病組較正常人對(duì)照組顯著增高(p均＜0.01) 。
四、討論
本研究發(fā)現(xiàn)正常人角朊細(xì)胞fas、ice不表達(dá) ， bax及bcl-2輕度表達(dá)；銀屑病角
表1　銀屑病患者皮損bax及bcl-2抗體平均陽(yáng)性標(biāo)記率(±s ， %)
組織類型例數(shù)baxbcl-2銀 屑 病1538.42±6.1886.40±4.2正常人對(duì)照510.61±4.3228.12±6.20t值-9.2623.91p值-＜0.01＜0.01 表2　銀屑病患者皮損bax及bcl-2標(biāo)記定量圖像分析結(jié)果(±s)
組別類型例數(shù)bax bcl-2數(shù)密度(×10-2/μm２)面積密度(×10-2μm２/μm２)數(shù)密度(×10-2/μm２)面積密度(×10-2μm２/μm２)銀 屑 病150.18±0.065.42±1.240.41±0.029.16±0.78正常人對(duì)照50.05±0.010.92±0.120.06±0.023.36±0.32t值-4.747.9610.7316.11p值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01
【銀屑病角朊細(xì)胞FasIceBax及bcl2基因的表達(dá)】 海軍重點(diǎn)課題基金資助(海軍后勤部司令部953316)朊細(xì)胞fas、ice除在少數(shù)病例(3/15)表達(dá)外 ， 其余病例基本上無表達(dá)；bax呈中度表達(dá) ， bcl-2重度表達(dá) 。定量分析表明銀屑病角朊細(xì)胞bax及bcl-2表達(dá)較正常對(duì)照組顯著增高 。korsmeyer［1 ， 2］假定“bcl-2—bax對(duì)”構(gòu)成了細(xì)胞內(nèi)的微調(diào)變阻器(preset rheostat within cells) ， bcl-2/bax比率決定細(xì)胞是接受或拒絕其接到的死亡命令 。若一個(gè)細(xì)胞內(nèi)bcl-2蛋白占優(yōu)勢(shì) ， 它結(jié)合掉所有的bax ， 余下的bcl-2相互結(jié)成“bcl-2—bcl-2對(duì)” ， 由此細(xì)胞就得以生存 ， 反之 ， 細(xì)胞則死亡 。在發(fā)育過程中 ， 當(dāng)細(xì)胞需要通過凋亡予以清除時(shí) ， bcl-2/bax比率應(yīng)降低［2 ， 3］ 。在本研究中 ， 銀屑病角朊細(xì)胞過度表達(dá)bcl-2蛋白 ， 由于bcl-2蛋白的生物學(xué)功能為拮抗細(xì)胞凋亡 ， 延長(zhǎng)細(xì)胞壽命 ， 進(jìn)而影響其某些功能活動(dòng) 。故bcl-2這種過度表達(dá)可能提示通過抑制涉及表皮角朊細(xì)胞最終分化程序的正常凋亡 ， 以致延長(zhǎng)銀屑病表皮角朊細(xì)胞的壽命 。有關(guān)銀屑病先前的研究主要集中在角朊細(xì)胞各種有絲分裂原如α-轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子與表皮生長(zhǎng)因子受體等 ， 以解釋銀屑病表皮增厚［4 ， 5］ 。而從本文結(jié)果可產(chǎn)生另一個(gè)推論：bcl-2過度表達(dá)潛在性地促進(jìn)了另一種細(xì)胞分化途徑 ， 導(dǎo)致表皮增厚 。

經(jīng)驗(yàn)總結(jié)擴(kuò)展閱讀