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系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血漿NO濃度測(cè)定

一氧化氮(no)是一種無(wú)色氣體 , 近3~4年的研究發(fā)現(xiàn)no作為一種新型的信號(hào)分子 , 調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和神經(jīng)功能 , 參與炎癥和組織損傷 , 特別是在血管和自身免疫性疾病中起著重要作用 , 已成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn) , 受到廣泛重視 。本研究測(cè)定了46例系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)患者血漿no的濃度變化 , 探討了no與sle發(fā)病以及與皮質(zhì)類固醇激素的用量關(guān)系 。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血漿NO濃度測(cè)定

文章插圖
一、材料和方法
(一)研究對(duì)象:46例sle患者 , 男4例 , 女42例;平均年齡31歲 , 均為住院患者 , 符合1982年ara診斷標(biāo)準(zhǔn) , 并已服用皮質(zhì)類固醇激素(以下簡(jiǎn)稱激素)或免疫抑制劑 。病情活動(dòng)程度根據(jù)臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室檢查積分而定[1] 。另設(shè)正常對(duì)照組24例 , 全部來(lái)源于本院輸血員 , 男3例 , 女21例;多次體檢均為健康者 , 平均年齡32歲 。
(二)血漿no測(cè)定方法[2]:取血樣500μl , 加35%磺基水楊酸100μl沉淀蛋白 , 離心(-4℃ , 10000r/min , 15分鐘) , 取上清液備用 , 酶標(biāo)板孔取上清液40μl , 加50% nh4cl 50μl、5% naoh 10μl室溫放置10分鐘;加入griess試劑(1%對(duì)氨基苯磺酸、0.1% n-萘基二乙胺、2.5%磷酸)100μl , 60℃水浴 , 0℃冰水浴各10分鐘 , 然后用酶標(biāo)儀550nm波長(zhǎng)讀取吸光度(a值 , 曾稱od值) , 同時(shí)以亞硝酸鹽(nano2)作為標(biāo)準(zhǔn)曲線 , 結(jié)果以轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛猁}的量(單位mol/l)表示 。
(三)激素對(duì)血漿no濃度影響的觀察:46例sle患者 , 以潑尼松為標(biāo)準(zhǔn)量(mg·kg-1·d-1)觀察激素用量與血漿no濃度變化 。
(四)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:t檢驗(yàn) , 相關(guān)分析 。
二、結(jié)果
(一)sle活動(dòng)組、非活動(dòng)組與正常對(duì)照組血漿no濃度比較:見(jiàn)表1 。表1中資料顯示 , sle各組血漿no濃度均略低于正常對(duì)照組 。經(jīng)t檢驗(yàn)各組間均無(wú)顯著性差異(p>0.05) 。
(二)激素對(duì)血漿no濃度影響結(jié)果:從表2資料可知:血漿no濃度隨著激素量的增加而呈下降趨勢(shì) 。經(jīng)相關(guān)分析 , r=
表1 sle活動(dòng)組、非活動(dòng)組與對(duì)照組血漿
no濃度比較(±s)
組 別例數(shù)no(×10-5mol/l)t值*p值正常對(duì)照組245.00±1.18--sle組464.26±0.60.519>0.05活動(dòng)組254.12±0.630.753>0.05非活動(dòng)組214.43±1.050.492>0.05 *與正常對(duì)照組比較
【系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血漿NO濃度測(cè)定】 表2 sle患者潑尼松用量(或相當(dāng)量)與
血漿no濃度的關(guān)系
潑尼松量(mg·kg-1·d-1)例數(shù)no(×10-5mol/l)0.2~0.2926.1390.3~0.3945.3170.4~0.5944.8040.6~0.79153.9910.8~0.9943.9281.0~1.1994.7341.2~1.4932.7731.5~1.9923.8932~2.4923.2152.513.077 -0.79 , p〈0.05 , 兩者呈負(fù)相關(guān) 。
三、討論
no是由no合成酶(nos)催化l-精氨酸(l-arg)而生成的 , 在哺乳動(dòng)物中有多種細(xì)胞可以產(chǎn)生no , 其中有三種不同類型的nos , 如神經(jīng)性nos(nnos)、誘導(dǎo)性nos(inos)和內(nèi)皮性nos(enos) 。有研究表明[3] , 在自身免疫疾病中有大量被激活的巨噬細(xì)胞 , 使inos充分表達(dá)導(dǎo)致no水平升高 。而本研究結(jié)果顯示:sle活動(dòng)組和非活動(dòng)組與正常對(duì)照組比較差異均無(wú)顯著意義(p>0.05) , 并沒(méi)有明顯升高 。除實(shí)驗(yàn)誤差外可能是sle患者自身產(chǎn)生的大量免疫復(fù)合物在血管壁沉積而引起了廣泛的血管炎癥 , 破壞了enos而使no產(chǎn)生減少;或是激素對(duì)磷脂糖和細(xì)胞因子(ifn-γ、il-2等)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)作用的抑制 , 阻止了inos的表達(dá)[4] , 從而使血漿no維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)平衡之中 。

經(jīng)驗(yàn)總結(jié)擴(kuò)展閱讀